Влияние лазерной микродиссекции блестящей оболочки эмбрионов на динамику ее истончения при использовании протоколов криоконсервации

В работе изучена динамика истончения блестящей оболочки эмбриона мыши в результате процедуры вспомогательного лазерного хетчинга, проводимой на стадии бластоцисты. В качестве модельных выбраны эмбрионы мыши, предварительно подвергнутые циклу заморозки–разморозки (криоэмбрионы). Для микрохирургии оболочки использовались лазерные импульсы фемтосекундной длительности (длина волны излучения – $512$ нм, длительность импульса – $100$ фс, интенсивность – $2.5$ ТВт/см$^2$). Толщина оболочки измерялась перед микрохирургией на стадии бластоцисты ($\sim\rm E3.5$, т.е. $3.5$ дня эмбрионального развития) и на стадии хетчинга (т.е. вылупления эмбриона из оболочки, $\sim\rm E5$). Обнаружено, что блестящая оболочка эмбрионов контрольной группы (криоэмбрионы, не подвергнутые лазерному воздействию) истончается сильнее $($с $6.6~(\rm E3.5)$ до $4.9$ мкм $(\rm E5))$ по сравнению с экспериментальными эмбрионами после процедуры вспомогательного лазерного хетчинга $($с $7.1~(\rm E3.5)$ до $6.4$ мкм $(\rm E5))$. И в первом, и во втором случаях изменения толщины оболочки являлись статистически значимыми. Полученные результаты сопоставлены с данными для “свежих” эмбрионов, не подвергавшихся процедуре криоконсервации. Выраженного эффекта “затвердевания” блестящей оболочки у криоэмбрионов по сравнению со “свежими” эмбрионами не выявлено. Применение процедуры вспомогательного лазерного хетчинга криоэмбрионов позволило повысить вероятность успешного хетчинга по сравнению с эмбрионами контрольной группы с $38.5$ до $52.5\%$.